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puma suede

 
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Autor Wiadomo¶æ
Rock Sheridan



Do³±czy³: 20 Maj 2020
Posty: 3

PostWys³any: Sro Maj 20, 2020 03:14    Temat postu: puma suede Odpowiedz z cytatem

Je suis végétarien et j'adore le site. Dernièrement, je suis devenu puma rs x obsédé par l'essai de nouvelles chaussures "minimalistes". Je n'ai pas vraiment creusé les cinq doigts. J'AIME le silence vert et ils m'ont servi pendant longtemps. Les chaussures Adidas Zero Trail étaient géniales, mais elles ne les fabriquent plus =ØAÞ J'ai récemment acheté une paire de Kinervas orange vif et je les aime. J'ai l'impression de courir comme un Kenyan en eux, bien que mon temps ne reflète pas vraiment cela =ØBÞ J'ai aussi utilisé la chaussure de trail New Balance 101 et j'adore! (en plus ça a l'air super mignon avec un jean) PS, j'ai partagé ton post sur Facebook!

PUMA est séquestré dans le cytoplasme des cellules GBM et du cancer du sein exprimant l'EGFR et l'EGFRvIII, indépendamment du stress apoptotique. L'étendue de la translocalisation mitochondriale PUMA, l'indice mtPUMA, est calculée comme décrit précédemment dans Matériaux et méthodes. (A) PUMA est principalement localisé dans le cytoplasme des cellules U87MG-EGFRvIII. Des cellules U87MG-EGFRvIII traitées avec un véhicule témoin, de la staurosporine (ST, 1 uM) ou de l'anisomycine (AN, 100 ng / ml) ont été récoltées et fractionnées en fractions mitochondriales et non mitochondriales. Des extraits de protéines des deux fractions ont été soumis puma rs x x à un Western blot pour détecter PUMA, l'a-tubuline (marqueur cytoplasmique) et Cox IV (protéine mitochondriale).

Le manque d'a-tubuline et de Cox IV dans les fractions mitochondriales et non mitochondriales, respectivement, a indiqué l'efficacité du fractionnement. De faibles indices mtPUMA indiquent que PUMA est principalement localisé dans le cytoplasme des cellules U87MG-EGFRvIII, dans des conditions non stressées et stressées. (B) PUMA est exclusivement localisé dans les fractions mitochondriales des puma cali cellules vecteurs U87MG. Les cellules du vecteur U87MG ont été traitées, fractionnées et les protéines analysées, comme décrit précédemment dans le panneau a. Les indices mtPUMA dans ces cellules sont de 1,0, indiquant que PUMA est exclusivement détecté sur les mitochondries de ces cellules, indépendamment du stress apoptotique. (C) La suppression de l'expression de l'EGFR par l'ARNsi conduit à une translocalisation mitochondriale accrue de PUMA. Dans les cellules GBM naturelles T98G traitées avec des siRNA témoins, PUMA est principalement localisé dans le cytoplasme.

Dans les cellules traitées par siRNA spécifiques à l'EGFR, nous avons observé une augmentation marquée du PUMA mitochondrial (panneau de gauche). L'ARNsi spécifique à l'EGFR a été efficace pour réduire l'expression de l'EGFR comme le montrent les Western Blots (panneau de droite). Lamine B: protéine nucléaire. ME: extraits mitochondriaux. NME: extraits non puma femme mitochondriaux. (D) PUMA est séquestré dans le cytoplasme des cellules cancéreuses du sein humaines exprimant l'EGFR. Les cellules MDA-MB-468, connues pour exprimer des niveaux élevés d'EGFR endogène [34], ont été traitées avec et sans staurosporine, fractionnées en fractions mitochondriales et non mitochondriales et en extraits de protéines analysés comme décrit précédemment. PUMA est principalement localisé dans le cytoplasme de ces cellules, dans des conditions non stressées et stressées, comme l'indiquent les faibles indices mtPUMA.

Des observations similaires ont en outre été trouvées dans des cellules GBM T98G qui expriment naturellement l'EGFR (figure 5c). La détection modeste de PUMA mitochondrial dans ces cellules pourrait être le résultat d'un EGFR cytoplasmique insuffisant pour interagir avec et séquestrer toutes les molécules de PUMA dans le cytoplasme. Surtout, l'expression de l'EGFR médiée par siRNA a entraîné une augmentation significative (16 fois) du PUMA mitochondrial (Fig. 5c-gauche), suggérant en outre la capacité d'EGFR à moduler la translocalisation mitochondriale du PUMA. L'ARNsi spécifique à l'EGFR était efficace pour réduire l'expression de l'EGFR comme le montrent les Western blots (Fig. 5c-droite). En plus des cellules GBM, nous avons trouvé que PUMA était localisé dans le cytoplasme des cellules cancéreuses du sein humain MDA-MB-468 (Fig. 5d) qui sont connues pour exprimer des niveaux significatifs d'EGFR endogène [34]. Collectivement, ces résultats démontrent que PUMA est séquestré dans le cytoplasme des cellules GBM et du cancer du sein exprimant EGFR et EGFRvIII, de manière constitutive et sous stress apoptotique.

Pour mieux comprendre les facteurs qui modulent l'interaction d'EGFR avec PUMA, nous avons examiné l'exigence d'activation d'EGFR pour l'interaction EGFR-PUMA. La figure 6a (panneau de gauche) montre que la capacité d'EGFR à se lier à PUMA était similaire dans les cellules U87MG-EGFR avec et sans stimulation d'EGF après une privation de sérum. Comme indiqué par l'absence d'EGFR auto-phosphorylé (p-EGFR, Y1068), les cellules U87MG-EGFR privées de sérum expriment l'EGFR puma suede inactif (figure 6a à droite). En revanche, le p-EGFR est facilement détecté dans les cellules traitées par l'EGF, ce qui indique que l'EGF a efficacement activé l'EGFR dans ces cellules. Pour déterminer davantage si une activité EGFR kinase est requise pour l'interaction EGFR-PUMA, nous avons traité les cellules U87MG-EGFR avec un inhibiteur de kinase EGFR de faible poids moléculaire, Iressa, qui est en usage clinique pour inhiber l'activité EGFR. Comme le montre la figure 6b (panneau de gauche), Iressa n'a pas modifié la liaison de l'EGFR à PUMA mais, comme [img]http://www.couleursoceanes.fr/images/look/puma suede-895iwk.jpg[/img] prévu, a considérablement réduit le niveau d'auto-phosphorylation / activation d'EGFR.
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Wys³any: Sro Maj 20, 2020 03:14    Temat postu:

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